Système de traitement antibiotique sélectif basé sur les résultats de Petrifilm™ au niveau quartier au tarissement

Tiré du projet de recherche : Traitement sélectif au tarissement basé sur le quartier en utilisant des diagnostics à la ferme.
Jean-Philippe Roy (chercheur principal, UMontréal), Fidèle Kabera (candidat MSc, UMontréal),
Greg Keefe (collaborateur, UPEI) et Simon Dufour (collaborateur, UMontréal)

Critère de sélection du troupeau

• CCS < 250,000 cellules/ml pour le lait du réservoir

Critères de sélection des vaches
  • Durée de tarissement : 45 – 75 jours
  • Gestante et en bonne condition physique
  • Pas de traitement antibiotique durant les 14 jours avant le tarissement
Prélever d’une façon stérile un échantillon de lait par quartier au jour précédent le tarissement
Culture de lait par quartier sur les Petrifilm AC

  • Identification des Petrifilm par quartier

  • Préparation d’une dilution de 1:10 de l’échantillon de quartier

  • Inoculation des Petrifilm par quartier

Lire et interpréter les Petrifilm

  • 0 – 4 colonies : quartier non infecté

  • ≥ 5 colonies : quartier infecté

Appliquer le traitement au tarissement par quartier selon les résultats des Petrifilm

  • 0 – 4 colonies : le quartier reçoit un scellant interne seulement

  • ≥ 5 colonies : le quartier reçoit un antibiotique de tarissement et un scellant interne

MATÉRIEL
R

Crayon marqueur

R

Applicateur (étaleur)

R

Seringues 3ml, 10ml et Aiguilles 1 1/2 pouce

R

Plaques de Petrifilm AC

R

Bouteille d'eau stérile

R

Gants pour usage unique

R

Incubateur

R

Tubes stériles d’échantillonnage

R

Tampon de gaze imbibés d’alcool 70%

NOTES
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Répéter les mêmes étapes pour les quatre quartiers de la vache (une plaque de Petrifilm pour chaque quartier).

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INOCULER CHAQUE PLAQUE DE PETRIFILM MD ET ÉTALER L’ÉCHANTILLON SUR LA ZONE CIRCULAIRE AVANT DE PASSER À LA SUIVANTE.

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ÉCHANTILLONNAGE, DILUTION ET INOCULATION DOIVENT ÊTRE FAITS AVEC PRÉCAUTION ET DE FAÇON STÉRILE :

  • Ne pas toucher l’intérieur du tube et du bouchon avec la seringue ou les doigts ou encore déposer le bouchon sur la table, lors des manipulations.
  • Changer la seringue et l’aiguille pour chaque quartier.
  • Désinfecter le bouchon de la bouteille d’eau stérile à chaque prélèvement.
  • Après ouverture, inscrivez la date sur la bouteille et conservez-la au réfrigérateur pour un maximum d’un mois.

Protocole d’inoculation des Petrifilm AC

(Test pour la numération de la flore totale aérobie)

Etape 1

Prélever 9 ml d’eau stérile et les mettre dans un tube stérile. Ne pas toucher l’intérieur du tube et du bouchon avec la seringue ou les doigts.

Etape 2

Prélever 1 ml de l’échantillon de lait.

Etape 3

Mettre 1 ml de lait dans un tube contenant 9 ml d’eau stérile (dilution 1:10).

Étape 4

Homogénéiser : Fermer le tube puis agiter le tube de lait dilué en le basculant de haut en bas au moins 5 fois.

Etape 5 Prélever 1 ml de lait dilué à l’aide de la seringue utilisée précédemment. Aspirer et remettre le lait dilué une fois, afin de rincer la seringue.

Étape 5

Prélever 1 ml de lait dilué à l’aide de la seringue utilisée précédemment. Aspirer et remettre le lait dilué une fois, afin de rincer la seringue.

Etape 6

Placer la plaque de Petrifilm préalablement identifiée (vache, quartier, date et heure) sur une surface plane, soulever le film supérieur, puis placer 1 ml de lait dilué au centre du film inférieur sans le toucher avec la seringue ou les doigts.

Etape 7

Relâchez le film supérieur. Déposer l’applicateur au-dessus du film supérieur (côté circulaire vers le bas) et y appliquer une légère pression pour distribuer l’échantillon sur la zone circulaire.
Crédits images: 3M

Etape 8

Mettre les Petrifilm à l’incubateur à 35 ° C pendant 24 heures. Assurez-vous qu’il contienne un peu d’eau pour maintenir une légère humidité.

Etape 9

Procéder à la lecture des résultats sur le Petrifilm. Chaque point représente une colonie bactérienne. Compter l’ensemble de la plaque, pas seulement un carré. Noter les résultats dans vos dossiers.